衰老是一个涉及氧化应激、炎症、自噬、线粒体损伤、端粒酶损伤和衰老的多因素过程。随着年龄的增长，衰老细胞的稳定积累会产生不利后果，即这些非增殖细胞占据关键的细胞生态位，并分泌促炎细胞因子，导致与衰老相关的疾病、虚弱和发病率。因此，衰老理论认为，人类衰老是衰老细胞积累的结果。与此相一致的是，从转基因孕小鼠和自然衰老小鼠中消除衰老细胞，可以增强对衰老相关疾病的抵抗力，延长寿命。
免疫系统在衰老过程中起着关键作用，研究表明，白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平升高与心脏病和痴呆等衰老疾病直接相关。因此，免疫衰老在衰老过程中起关键作用。
衰老的免疫系统细胞可能是所有衰老细胞中最有害的细胞之一，因为它们会在其他身体器官和系统中传播组织损伤和衰老。免疫系统具有控制衰老的机制。积聚的衰老细胞通常被免疫系统清除。因此，衰老的免疫系统是维持和延长健康的关键治疗目标。然而，免疫系统对抗自身衰老的能力是有限的。
作为介导抗肿瘤和抗病毒反应的主要先天性淋巴细胞亚群，NK细胞也参与了衰老细胞的监测。在体外和小鼠模型中NK细胞消除衰老细胞，其中NK细胞参与小鼠模型中的纤维化逆转和衰老细胞清除。
目前，缺乏关于NK细胞对人类免疫衰老的影响的数据。在这里，我们通过5个案例研究了自体增殖和活化NK细胞(aNK)在免疫衰老中的作用。我们的数据表明，NK细胞治疗是安全的，可以减少人类的免疫衰退。此外证明了免疫衰老在减少与年龄相关的炎症反应中的作用。
队列1由3名个体组成，为70岁（A）、50岁（B）和41岁（C）的男性。NK细胞扩增后，来自队列1的每个个体接受1×109个NK细胞。队列2由2名个体组成，1名50岁女性（D）和1名52岁男性（E）。队列2接受2次，每次2×109NK细胞输注。
PBMC的CD3（-）CD56（+）NK细胞中位数为11.2%（5.9–13.6）。平均培养15天后（14–19），在扩增指数阶段的峰值收获aNK细胞，中值为91.0%的CD3（-）CD56（+）aNK细胞（范围83.4–96.0），平均扩增198倍（范围128–373）。
为了证明这种扩增和刺激NK细胞的方法是有效的，我们用LDH释放试验在体外测试了PBMC和aNK细胞对K562细胞的细胞毒性。aNK细胞在体外以剂量依赖的方式获得更高水平的抗K526细胞的细胞毒性活性。
使用衰老的皮肤成纤维细胞，通过中性红吸收和释放试验评估NK细胞的细胞毒性效应。在K562细胞中观察到，aNK细胞对衰老皮肤成纤维细胞的细胞毒性水平高于幼稚NK细胞。
此外，我们通过视频记录了aNK细胞活性的体外细胞毒性。在这里，我们展示了aNK细胞消除衰老成纤维细胞的时间过程视频。值得注意的是，视频显示了aNK之间的高度合作，aNK细胞同时启动细胞毒性，并消除了不同目标上的衰老成纤维细胞。
三个个体（队列1）输注1.0×109自体aNK细胞。未发现不良反应，所有血液检测指标结果均在正常生理范围内。在不同的时间点，从供体A、B和C分离PBMC，并在输注aNK细胞之前以及输注后第14天和第90天评估衰老标记物p16和β-半乳糖苷酶。aNK细胞输注后，三个人的p16和β-半乳糖苷酶水平均降低。在aNK细胞输注前（第0天），观察到所有三个供体的两种标记物的最高水平。aNK细胞输注后90天，衰老标记物向基线增加，尽管在所有三个供体中仍低于基线。值得注意的是，个体年龄越大，输注aNK细胞前p16和β-半乳糖苷酶的水平越高。同样，在aNK细胞输注后第14天，p16和β-半乳糖苷酶的年龄较大的个体出现了更大的减少。数据表明，aNK细胞会减少PBMC中衰老标记物的表达。
为了了解aNK细胞的其他影响，我们对供体a、B和C进行了50种细胞因子炎症谱分析。所有3个供体的结果都不同。在进行的50种细胞因子中，有27种可在所有3个供体中检测到。由于许多人没有表现出相关的变化或模式，在此，我们提出了7种不同的细胞因子/蛋白质，这些细胞因子/蛋白在aNK细胞输注后在所有三个供体中都有趋势（补充材料2）。输注aNK细胞后，T细胞特异性RANTES呈升高趋势，而铁蛋白、单核细胞趋化蛋白-1、IL-6和IFN-γ呈下降趋势。值得注意的是，患有炎症性肠病（IBD）的供体C在输注aNK细胞之前炎症标志物IL-6、IL-17A、IFN-γ和IL-27上调，在许多情况下输注后显著降低至几乎检测不到。
为了再现单剂量输注aNK细胞对衰老标志物的影响（队列1），两个个体（队列2，供体D和E）每次输注2.0×109个aNK细胞，192天再次输注。输注前（基线）在输注当天（0和192）采集血液。总研究期为459天。对于队列2，第一次aNK细胞输注对衰老标志物的影响与队列1相似。与第一次输注相比，第二次输注再次下降。
安全性和血液数据未显示，所有输注均耐受良好，无不良反应。
总之，数据表明，一次或两次输注aNK是安全的，会在长达6个月的时间内抑制免疫衰退。这代表了一种新的治疗方法，以减少衰老的有害特征，如炎症和免疫衰老。由于仅观察5例，需要对更大的队列和对照安慰剂进行进一步研究。
来源：中华细胞与干细胞杂志电子版
原标题：回输自体NK细胞具有抗衰老功能
作者：编译/廖联明
